Izolování DNA

Co budeme potřebovat?

• cca 1/3 banánu
• lžičku
• kuchyňské prkénko
• kelímek
• kádinku
• trychtýř
• papírový filtr do kávovaru (V60)
• sůl (2 špetky)
• šampon
• destilovanou vodu
• líh (vychlazený, z lednice)
• Petriho misku nebo talířek z čirého skla
• list černého papíru nebo tmavý povrch

Postup

1. V kelímku smíchejte šampon a sůl.

2. Přilijte destilovanou vodu a opět opatrně smíchejte, ať tekutina nepění.

3. Banán na prkénku druhou stranou lžičky nakrájejte na kousky.

4. Nakrájený banán nasypte do kelímku s připravenou směsí.

5. Banán důkladně rozdrťte třením lžící o stěny kelímku.

6. Postavte trychtýř na kádinku nebo sklenici a vložte do něj papírový kávový filtr. Nalejte dovnitř připravenou směs, kterou necháte filtrem prokapat. Filtrace může trvat i několik minut.

7. Petriho misku či talířek z čirého skla položte na tmavý povrch (kvůli světlu). Do misky či talířku nalejte vychlazený líh, do kterého přidáte kapku vyfiltrovaného roztoku s banánem.

8. Vezměte si lupu a pozorujte. V lihu uvidíte vysráženou bílou DNA!

Vysvětlení

DNA se nachází v jádře buňky. V rostlinné buňce je chráněna dvěma typy bariér – pevnou buněčnou stěnou a lipidickými membránami. Mačkáním dužniny ovoce narušíme vnější buněčnou stěnu. Vnitřní membrány rozruší šampon. Spolu s DNA se do roztoku uvolní i ostatní látky, jako jsou enzymy štěpící DNA (DNázy). Činnosti DNáz musíme zabránit – rozkládaly by „naši“ DNA. DNázy potřebují ke správné funkci hořečnatý ion. Pokud při izolaci použijeme šampon s přídavkem EDTA (kyselina ethylendiamintetraoctová), hořečnaté ionty se na ni navážou a my tak vyřadíme DNázy z provozu. Následnou filtrací odstraníme z roztoku všechny nerozpustné části buňky. Nalitím získaného roztoku do studeného ethanolu (lihu) DNA vysrážíme.